This study aimed to report three cases of contagious agalactia (CA) by Mycoplasma agalactiae in goat kids born with polyarthritis. The nanny goats belonging to two different herds presented clinical signs of CA during pregnancy and in parturition they were apparently healthy. The carpal articulations of the three goat kids, the tarsus articulation in one, and thigh-femoral articulation in another showed swelling, pain and impairment of the flexion-extension movements. The articular liquid was collected from two goat kids at birth and revealed a content which varied from transparent to fibrinopurulent, presenting a yellow coloring. The samples were plated on modified Hayflick. The colonies had the appearance of "fried egg" and were confirmed as being M. agalactiae by biochemical tests and 16S rRNA PCR. Blood was collected from three animals soon after birth and submitted to the indirect ELISA test for the determination of the titration of the anti- M. agalactiae antibodies. The results confirmed that the goat kids were infected during pregnancy by M. agalactiae and resulted in the birth of an offspring with clinical signs of CA being immune tolerant.

Este trabalho tem como objetivo avaliar a eficácia de três vacinas inativadas contra agalaxia contagiosa, preparadas com amostra de Mycoplasma agalactiae isolada no Brasil e diferentes adjuvantes. A vacina 1, adsorvida com hidróxido de alumínio, foi administrada em 23 caprinos (Gc1) e 13 ovinos (Gov1); a vacina 2, contendo Montanide IMS-2215-VG, foi administrada em 22 caprinos (Gc2) e 12 ovinos (Gov2); e a vacina 3, contendo Montanide Gel-01 foi administrada em 22 caprinos (Gc3) e 12 ovinos (Gov3). Todos os animais eram negativos para Ma no ELISA indireto e receberam duas doses de 2mL cada, por via subcutânea, com intervalo de 21 dias. Cinco animais de cada espécie foram utilizados como controle. Setenta e cinco dias após o reforço, quatro animais de cada grupo vacinado e dois do grupo controle foram desafiados com 5mL de cultura de Ma contendo 10(7)ufc/mL, por via oral e pela imersão dos tetos das fêmeas em lactação. A resposta sorológica foi analisada nos dias da vacinação (zero e 21) e aos 51, 81, 111, 141 e 171 dias pós-vacinação. As coletas e análises dos animais desafiados foram realizadas no dia do desafio (D0) e sete, 14, 21, 28, 35, 42, 49 e 56 dias pós-desafio. As três vacinas induziram produção de anticorpos, não havendo diferença estatisticamente significativa entre caprinos e ovinos (P>0,05). Animais dos grupos Gc1, Gc2 e Gov2 produziram níveis de anticorpos mais elevados, com diferença estatisticamente significativa em relação aos demais grupos vacinados e ao grupo controle (P<0,05). Após o desafio, os animais do grupo controle apresentaram aumento de linfonodos regionais e conjuntivite, mastite e artrite. Em quatro animais vacinados, foi observada discreta conjuntivite e congestão dos vasos episclerais. Conclui-se que as vacinas 1 e 2 induziram níveis de anticorpos protetores em caprinos e ovinos suficientes para proteção clínica dos animais submetidos à infecção experimental, podendo ser indicadas para prevenção da agalaxia contagiosa.

This paper aims to evaluate the efficiency of three inactive vaccines against contagious agalactia prepared with samples of Mycoplasma agalactiae isolated in Brazil and different adjuvants. Vaccine 1 adsorbed with aluminum hydroxide was administered in 23 goats (Gc1) and 13 sheep (Gov1); vaccine 2 containing Montanide IMS-2215-VG was administered in 22 goats (Gc2) and 12 sheep (Gov2) and vaccine 3, containing Montanide Gel-01 was administered in 22 goats (Gc3) and 12 sheep (Gov3). All animals were negative for Ma at indirect ELISA and received two doses of 2mL each, subcutaneously, within a 21 day interval. Five animals from each species were used as control. Seventy-five days after the booster, four animals from each vaccinated group and two from the control group were challenged with 5mL of Ma culture containing 10(7)cfu/mL, orally and through immersion of the female's udder in lactation. The serological response was analyzed during vaccination days (0 and 21) and at 51, 81, 111, 141 and 171 days after vaccination. The collection and analysis of the challenged animals were conducted at the day of the challenge (D0) and 7, 14, 21, 28, 35, 42, 49 and 56 days after the challenge. The three vaccines induced the production of antibodies, having no significant statistical difference (p<0.05). Animals from groups Gc1, Gc2 and Gov2 developed higher levels of antibodies, with significant statistical difference compared to the other vaccinated group and control group (p<0.05). After the challenge, the animals from the control presented an increase in regional lymph nodes and conjunctivitis, mastitis and arthritis. In four vaccinated animals, discrete conjunctivitis and congestion of the episcleral veins was observed. It is concluded that vaccines 1 and 2 induced levels of protective antibodies in goats and sheep, sufficient for clinical protection of the animals submitted to the experimental infection, indicating its use on the prevention of contagious agalactia.

O objetivo deste estudo foi avaliar a ocorrência da infecção pelo vírus Maedi-Visna em ovinos criados nas microrregiões de Botucatu, Campinas, Piedade e São Paulo do Estado de São Paulo. As amostras de soro sanguíneo foram colhidas de 226 ovinos e foi realizada a técnica de imunodifusão em gel de ágar para a detecção de anticorpos antivírus Maedi-Visna e verificou-se que nenhuma das amostras testadas foi sororeagente. Dessa forma, faz-se necessário um estudo mais amplo no estado, a fim de se confirmar a baixa ocorrência e importância da enfermidade no estado.

The purpose of the study was to evaluate the occurrence of infection with maedi-visna virus in sheep raised in the regions of Botucatu, Campinas, Piedade and São Paulo, state of São Paulo, Brazil, that showed symptoms of the disease. Blood serum samples collected from 226 sheep were submitted to the agar gel immunodiffusion technique for detection of antibodies against maedi-visna virus, and none of the samples tested was serum reactive. In conclusion, the maedi-visna virus has low frequency in animals raised in the regions studied.

RESUMO A Artrite Encefalite Caprina é uma enfermidade de caráter multissistêmico afetando animais de qualquer idade e sexo; causado por um Lentivirus caprino pertencente ao grupo de Lentivirus de Pequenos Ruminantes. Os sintomas conhecidos são leucoencefalomielite, pneumonia intersticial crônica, artrite e mastite intersticial endurativa. Foi descrito que machos soropositivos apresentavam sêmen infectado pelo Lentivirus e processo inflamatório gradual do testículo. A detecção em amostras de sêmen pelas técnicas de PCR e nested-PCR são caracterizadas como métodos de altas especificidade e sensibilidade provendo resultados rápidos. O objetivo do estudo foi detectar, por meio da técnica molecular de PCR e nested-PCR, a presença de DNA pró-viral do Lentivirus caprino em amostras de sêmen de reprodutores criados no Estado de São Paulo. Das 17 amostras, cinco (29,4%) apresentaram a detecção do vírus provando que há a presença de partículas virais no sêmen dos caprinos reprodutores soropositivos a Atrite Encefalite Caprina estudados.

ABSTRACT Caprine arthritis encephalitis is a multisystemic infectious disease caused by a lentivirus and may affect animals of any age or sex. The major symptoms are leukoencephalomyelitis, chronic interstitial pneumonia, arthritis and hardening interstitial mastitis. It has been reported that the testicles of infected animals present infected semen and a gradual inflammatory process. For the detection of the agent in semen samples, PCR and nested PCR techniques are characterized as methods with high specificity and sensibility that provide fast results. The objective of this study was to detect the presence of pro-lentiviral DNA in the semen of caprine males in São Paulo State, Brazil, by the PCR and nested PCR molecular techniques. Five (29.4%) of the 17 samples presented positivity for the detection of the virus, proving the presence of viral particles in the semen of male goats seropositive for caprine arthritis encephalitis in this study.

The prevalence of antibodies against bluetongue virus was investigated in 41 dairy goats and 40 sheep herds in the semi-arid region of Pernambuco state and the conditions for insect Culicoides maintenance, considering climate dynamics and vector competence, were evaluated. The percents of seropositive herds in agar gel immunodiffusion test for bluetongue virus group were 24 for goats and 27.5 for sheep. The estimated prevalences of seropositive animals were 3.9% for goats (n = 410) and 4.3% for sheep (n = 400). The prevalences of seropositive animals were low in the mesoregion of Sertão Pernambucano (4.8% for goats and 4.1% for sheep) and São Francisco Pernambucano (1.0% for goats and 4.5% for sheep). There were no significant differences between species and regions. Considering the social and economic importance of goats and sheep raising in the semi-arid region, it is essential to establish preventive measures to control imports of ruminants from these areas.

RESUMO Este trabalho teve como objetivo determinar a frequência e os possíveis fatores de risco as-sociados à ocorrência da Leucose Enzoótica Bovina (LEB) na bacia leiteira do Estado do Maranhão. Amostras de soro de 920 animais da raça girolanda foram submetidas à técnica de imunodifusão em gel de ágar. O estudo foi realizado em 92 propriedades leiteiras, pertencentes a 23 municípios localizados nas regionais de Açailândia, Bacabal, Ilha de São Luís, Imperatriz e Pedreiras. Em cada propriedade avaliada, aplicou-se questionário epidemiológico para investigar os fatores de risco que poderiam estar associados a esta infecção. Das 920 amostras de soro analisadas, 53,80% foram reagentes. Nas regionais obtiveram-se frequências de 63,50%, 61,87%, 60,62%, 41,18% e 30,83%, para Bacabal, Ilha de São Luís, Pedreiras, Imperatriz e Açailândia, respectivamente. Nos 23 municípios amostrados foram encontrados animais reagentes, com detecção de bovinos sorologicamente positivos em 98,91% das propriedades. Dentre os fatores de risco avaliados, uso repetido da mesma agulha para colheita de sangue ou vacinação, uso repetido da mesma luva obstétrica, estabulação dos animais e ausência de assistência veterinária apresentaram significância estatística (P < 0,05) associada à LEB. Os resultados do estudo indicam que a frequência de anticorpos para a Leucose Enzoótica Bovina foi elevada na bacia leiteira do Estado do Maranhão e que os fatores relacionados ao manejo estiveram associados ao risco de infecção nos bovinos.

ABSTRACT This study was performed in order to determine the frequency of antibodies to enzootic bovine leukosis (EBL), and the main factors related to the infection in dairy herds of Maranhão State, Brazil. Serum samples from 920 animals were submitted to the agar gel immunodifusion technique. The study was carried out on 92 dairy properties, in 23 districts located in the regions of Açailândia, Bacabal, São Luis Island, Imperatriz and Pedreiras. An epidemiological questionnaire was applied for each herd to investigate variables that could be associated with this infection. Of the 920 serum samples examined, 53.8% were reagent. The frequency breakdown by region was 63.50%, 61.87%, 60.62%, 41.18% and 30.83%, for Bacabal, São Luis Island, Pedreiras, Imperatriz and Açailândia, respectively. Reagents animals were found in the 23 districts studied, with detection of serologically positive bovines on 98.91% of the properties. Variables identified as risk factors included the repeated use of the same needle for blood sampling or vaccination, repeated use of the same obstetric glove, animal housing and absence of veterinary assistance. These risk factors presented a statistical significance (P < 0.05) associated to infection. These results indicate that enzootic bovine leukosis infection is high in dairy herds of the state of Maranhão and that factors related to livestock management were associated with the risk of EBL infection.

O objetivo deste trabalho foi verificar a ocorrência de Mycoplasma agalactiae, com o uso da reação em cadeia da polimerase (PCR), em 30 rebanhos caprinos leiteiros nas microrregiões do Cariri Ocidental e Oriental do estado da Paraíba. Das 120 amostras de leite testadas, nove (7,5%) apresentaram amplificação de apenas um fragmento com 360pb. As amostras que amplificaram este fragmento estavam presentes em 6/30 (20%) fazendas localizadas nos municípios de Amparo, Santo André e Gurjão.

RESUMO O sorodiagnóstico das lentiviroses de caprinos e ovinos é realizado principalmente pela imunodifusão em gel de agar (AGID) e/ou ELISA. Embora relativamente simples, esses métodos não identificam os antígenos virais reconhecidos na resposta imune do animal examinado, por isso o western blot (WB) vem ganhando maior relevância como ferramenta de diagnóstico dessas enfermidades. Neste trabalho, o antígeno utilizado no WB foi obtido através de um sistema simplificado de purificação: concentração por diálise do sobrenadante de culturas celulares infectadas, seguido de centrifugação em gradiente contínuo de sacarose. A separação das proteínas virais foi obtida por SDS-PAGE a 10% e a transferência para membranas de nitrocelulose realizada pelo sistema semi-úmido. A revelação das membranas mostrou reconhecimento pelo soro padrão positivo de cinco proteínas, com pesos moleculares de 14-16, 25, 40, 50 e 70 kDa. Todas as 8 amostras de soro caprino, positivas na ADIG, reconheceram pelo menos uma banda proteíca no immunoblot, variando contudo o número de bandas reconhecidas. Reação positiva à glícoproteína 40 (gp 40) foi observada em quatro animais, com intensidade de reação discreta em três deles. Dois animais apresentaram reação positiva à proteína 16 (p16), e dois à gp 50, de pouca intensidade. Quanto à gp 70, proteína que, embora reagisse com o soro padrão positivo, não foi reconhecida por nenhum dos soros testados. Estes resultados sugerem que o WB pode ser empregado para o sorodiagnóstico rotineiro das lentiviroses, ensejando estudos mais amplos do padrão de reconhecimento dos antígenos apresentados por este novo sistema de purificação parcial de componentes virais.

ABSTRACT The serodiagnosis of small ruminant lentivirus (SRLV) infections in goats and sheep is usually performed by the agar-gel immunodiffusion technique (AGID) and by ELISA. Therefore, the western blot (WB) is the choice for the definition of antigen recognition patterns during the disease progression, being potentially useful for the diagnosis itself. In the present study, the antigen used for WB was obtained by a novel simple purification procedure: the dialysis of the supernatant of infected cultured cells, followed by centrifugation in sucrose gradient. Proteins in the pellet were separated by SDS-PAGE at 10% density and transferred to nitrocellulose membranes in a semi-dry blotting device. After development, five viral proteins were recognized by the standard positive serum sample, with molecular weights of 14-16, 25, 40, 50 and 70 kDa respectively. All 8 AGID positive goat serum samples recognized at least one band in the immunoblot, with different intensities. The total number of bands recognized by each serum sample varied considerably. A positive reaction to gp40 was observed with 4 sera, although rather weak in 3 cases. Two samples were reactive to p16 and two others to gp50, although weakly. Curiously, no serum was reactive to the 70 kDa antigen, recognized by the standard positive serum sample. These results suggest that the WB can be effectively used for the routine serodiagnosis of viral caprine arthritis encephalitis infection (CAEV). It can also support further studies on antigen recognition patterns with the new antigen provided by the novel simplified purification system of viral components described here.

This work was performed in 60 goat farms located in 15 counties of the micro regions of Western and Eastern Cariri, in Paraiba, to describe and analyze the sanitary profile of the flocks. Visits were done and the answers, obtained from questionnaires that were applied to the farmers, were used. It was observed a mortality of 20% in young animals in 80% of the farms. The presence of technical assistance in 93.3% in the studied farms, adoption of prophylactic calendar in 85% and parasitic control in 83.3% of the flocks were also observed.

RESUMO Os pequenos ruminantes podem ser infectados por um grupo de vírus genericamente denominado de Lentivírus de Pequenos Ruminantes (LVPR), que compreende vários isolados, distribuídos em quatro grupos filogenéticos. Os vírus Maedi-Visna (MVV) e da Artrite Encefalite Caprina (CAEV), originalmente, isolados de ovinos e caprinos, respectivamente, são os protótipos dos dois grupos. O objetivo desse trabalho foi isolar, identificar amostra de LVPR e realizar levantamento sorológico, em ovinos da raça Santa Inês. Através do co-cultivo de células de membrana sinovial ovina e sangue periférico de um ovino soropositivo ao teste de IDGA foi isolado LVPR, amostra BrPe2-01, identificada pelo aparecimento de sincícios nas monocamadas e pela reação em cadeia da polimerase (PCR). A sorologia foi feita através do teste de Imunodifusão em Gel de Agar (IDGA) em animais de 25 propriedades procedentes das regiões Agreste, Sertão, Mata Meridional e Metropolitana do Estado de Pernambuco, totalizando 558 amostras. Os resultados demonstraram sorologia positiva em 6 (1,07%) ovinos de 3 (12%) rebanhos estudados. Concluiu-se que os ovinos da raça Santa Inês estão sendo infectados pelos LVPR, porém com baixa prevalência.

ABSTRACT Small ruminants can be infected by a group generically denominated as small ruminant lentiviruses (SRLV), which comprehend several isolates, distributed into four phylogenetic groups. The Maedi-Visna (MVV) and caprine arthritis encephalitis (CAEV) viruses, originally isolated from ovine and caprine, respectively, are the prototypes of both groups. The objective of this work was to isolate and identify an SRLV strain and carry out a serological survey in ovines of the Santa Inês breed. Through co-cultivation of ovine sinovial cells and leucocytes of a seropositive ewe, LVSR was isolated (BrPe2-01 strain), and identified by the appearance of syncitium on the monolayers and by polymerase chain reaction (PCR). The serology was done through the agar gel immunodiffusion test (AGID) in 558 sheep of 25 flocks from the state of Pernambuco, Brazil. The results demonstrated positive serology in 6 (1.07%) sheep of 3 (12%) studied flocks. It was concluded that the ovine of the Santa Inês breed are being infected by SRLV, with low prevalence.

The prevalence of small ruminant lentivirus (SRL) infection was evaluated in goats and sheep in two counties of Pernambuco State, Brasil. Seriological examinations were performed from a total of 672 goats and 325 sheep, one year of age and older, at two abattoirs. Sera were analyzed by agar gel immunodiffusion using Maedi-Visna K-1514 antigens. There were 42 reactive samples (95% confidence interval 3.6% to 4.9%) in both slaughter houses. In São Lourenço da Mata county, 3.2% and 4.0% of goat and sheep sera were responsive, whereas in Paulista county, 5.1% of goat samples and 8.2% of sheep were reactive. Thus, the prevalence of small ruminant lentivirus was low in goats and sheep sampled from the region.

RESUMO Foi realizada a avaliação clínica de 2 caprinos acometidos por artrite atendidos junto a Clínica de Bovinos e Pequenos Ruminantes da FMVZ-USP. O diferencial entre artrite viral causada pelo vírus da CAE e a artrite bacteriana pelo Mycoplasma spp. foi feito baseado no exame específico, sorodiagnóstico, nas técnicas de isolamento, detecção do vírus pela PCR do líquido sinovial e laparoscopia.

ABSTRACT This work was undertaken with the aim of studying the clinical evaluation of arthritis in 2 goats at the Hospital of Bovines and Small Ruminants at FMVZ-USP, Brazil. The differential between viral arthritis caused by the virus of the CAE and the bacterial arthritis by Mycoplasma spp. was made by using clinical exam, laparoscopy of the affected region, PCR, serum diagnose, techniques of culture isolation and PCR of the sinovial fluid.

Estudaram-se a ocorrência e os fatores predisponentes à artrite encefalite caprina (CAEV) no Rio Grande do Norte. O questionário epidemiológico aplicado a 42 proprietários de 11 municípios produtores de leite avaliou o grau de instrução escolar do proprietário, a origem dos animais, o tipo de criação, as enfermidades mais freqüentes e o manejo sanitário, em geral, bem como as taxas de morbidade e mortalidade. Prevalência de 11% de infecção pelo CAEV foi observada nos rebanhos, com animais soropositivos em todos os municípios pesquisados. As condições de criação mostraram que há fatores que predispõem à introdução ou disseminação da doença na região estudada.

The prevalence of caprine arthritis-encephalitis (CAE) infection in dairy goat herds from Rio Grande do Norte State, Brazil, was estimated, and the predisposing factors to the infection were identified. An epidemiologic survey was held to collect information on educational level of the owner and origin of the animals, and on sanitation and vaccination practices, diseases, morbidity and mortality rates in the herds. The prevalence of CAE virus infection was 11%, and CAE was always observed in some goats in all studied municipalities.

Amostras do vírus da artrite-encefalite caprina (CAEV) de animais dos estados de Minas Gerais e Pernambuco foram isoladas a partir de explantes de membrana sinovial (MS) (amostras BrMg 1-01, BrMg 2-01, BrMg 2-02, BrMg 2-03 e BrPe 1-01) ou de co-cultivo de leucócitos com MS (BrMg 1-02). As amostras foram identificadas pelo efeito citopático-ECP (formação de sincícios), imunofluorescência direta (IFD) e reação em cadeia de polimerase (PCR) aperfeiçoada para amplificação de parte do gene gag da amostra CAEV Cork. O estudo do ECP revelou a presença de amostras pouco (BrMg 1-01 e BrMg 1-02) ou fortemente indutoras de ECP (BrMg 2-01, BrMg 2-02, BrMg 2-03 e BrPe 1-01). A IFD mostrou resultado positivo em células de todas as monocamadas infectadas pelas amostras isoladas e em células de referência (CAEV Cork e visna/maedi K 1514). A PCR do DNA de células infectadas resultou na amplificação específica de um fragmento de DNA de 286pb da amostras testadas, exceto do visna/maedi K 1514.

This paper describes the isolation of caprine arthritis-encephalitis virus (CAEV) in Minas Gerais and Pernambuco States, Brazil, using goat synovial membrane (GSM) explants (isolates: BrMg 1-01, BrMg 2-01, BrMg 2-02, BrMg 2-03 and BrPe 1-01) or co-culture of blood mononuclear cells with GSM (BrMg 1-02). The isolates were identified by cytopathic effect (CPE), direct immunofluorescence (DIF) and an improved polimerase chain reaction (PRC) specific to CAEV (strain Cork) genome. It was found isolates of low (BrMg 1-01 and BrMg 1-02) and of high lytic (BrMg 2-01, BrMg 2-02, BrMg 2-03 and BrPe 1-01) phenotypes. The DIF revealed positive results in cells infected by all isolates tested and the reference strains of CAEV (Cork) and visna-maedi (K1514). The used PCR amplified a 286 pb fragment of DNA from cells infected with all isolates and CAEV Cork but not with visna-maedi K1514.